滋阴化痰方调控肿瘤细胞来源外泌体对HUVECs管样分化的影响
实验研究
滋阴化痰方调控肿瘤细胞来源外泌体对HUVECs管样分化的影响
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目的：
探讨滋阴化痰方（Ziyin Huatan Recipe，ZYHT）调控肿瘤细胞来源外泌体（exosomes，Exos）对人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells，HUVECs）管样分化的影响。
方法：
①将2种不同剂量的ZYHT分别与胃癌细胞株SGC-7901和MGC-803共培养48 h，使其主动进入细胞内，收集细胞上清液提取外泌体，透射电镜观察外泌体形态，Western blot法检测其膜表面标志性蛋白TSG101和CD81，用纳米颗粒跟踪分析仪NanoSight分析外泌体粒径分布范围。②PKH67荧光标记外泌体，并与HUVECs共培养，共聚焦显微镜观察外泌体能否被HUVECs摄取。③通过体外Matrigel基质胶实验，观察含不同剂量ZYHT的SGC-7901-Exos与MGC-803-Exos对HUVECs管状结构形成能力的影响。上述实验以等量PBS作为对照。
结果：
①经鉴定从胃癌细胞上清液中提取的外泌体为形态一致的圆形或椭圆形膜性囊泡，表达标志性蛋白TSG101和CD81，粒径范围30～200 nm。②共聚焦显微镜观察示肿瘤细胞来源外泌体可被HUVECs摄取。③在体外Matrigel胶成管实验中，随着外泌体浓度的增加，实验（含ZYHT高、低剂量）组分支总长度明显少于对照（PBS）组。
结论：
ZYHT可通过调控肿瘤细胞外泌体进而抑制胃癌血管新生。
滋阴化痰方胃癌细胞株外泌体血管新生人脐静脉内皮细胞
