探讨重楼皂苷Ⅰ（polyphyllin Ⅰ，PPⅠ）抑制人乳腺癌细胞增殖及分子机制。以人乳腺癌细胞株BT474细胞、MDAMB-436细胞为研究对象，设为空白组和不同浓度的PPⅠ处理组。采用MTT法、台盼蓝染色细胞计数实验、实时无标记动态细胞分析技术和克隆形成实验检测PPⅠ对2种细胞增殖的影响；采用Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术检测细胞凋亡率，JC-1法检测线粒体膜电位；蛋白免疫印迹法检测凋亡相关蛋白caspase-3和PARP的表达及EGFR、Akt和ERK信号通路蛋白的表达及磷酸化水平；分子对接模拟PPⅠ与EGFR的结合方式及作用模式；基于靶点稳定性的药物结合实验检测PPⅠ与EGFR的直接结合作用。结果表明，PPⅠ以时间和浓度依赖方式抑制细胞增殖及克隆形成。PPⅠ处理组的细胞凋亡率显著增加，线粒体膜电位显著降低；PPⅠ能下调caspase-3蛋白前体的表达，促进PARP切割。PPⅠ对EGFR、Akt和ERK总蛋白表达水平无明显影响，但明显能降低EGFR、Akt、ERK的磷酸化水平；分子对接模拟发现PPⅠ能够与EGFR胞外区发生结合，与其中Gln366残基形成氢键；靶点稳定性的药物结合实验进一步确证了PPⅠ能显著阻止了蛋白酶pronase对EGFR的水解作用，表明PPⅠ与EGFR具有直接结合作用。总之，PPⅠ能通过靶向EGFR阻断其下游信号通路抑制乳腺癌细胞增殖并诱导凋亡。该研究为PPⅠ后续在乳腺癌的靶向治疗药物的开发奠定了基础。