该研究基于Keap1/Nrf2与TLR4/NF-κB p65信号通路研究藏族药二十五味松石丸（Ershiwuwei Songshi Pills，ESP）改善对乙酰氨基酚（acetaminophen，APAP）致小鼠肝损伤的作用机制。将昆明小鼠随机分为空白组，模型组，二十五味松石丸高（400 mg·kg^-1）、中（200 mg·kg^-1）、低（100 mg·kg^-1）剂量组和乙酰半胱氨酸（N-acetyl-L-cysteine，NAC）组。各给药组小鼠均连续给药14 d后，除空白组外，其余各组小鼠腹腔注射200 mg·kg^-1 APAP，12 h后收集小鼠血清与肝脏组织。通过肝脏病理切片苏木精-伊红染色（hematoxylin-eosin staining，HE），并检测小鼠血清中天冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase，AST）、丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase，ALT）水平以及肝组织匀浆中谷胱甘肽（glutathione，GSH）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、过氧化氢酶（catalase，CAT）、髓过氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）、总抗氧化能力（total antioxidant capacity，T-AOC）水平，观察与分析二十五味松石丸对APAP致小鼠肝损伤的保护作用。通过ELISA法测定小鼠血清中肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor-alpha，TNF-α）、白细胞介素（interleukin-1beta，IL-1β）与（interleukin-6，IL-6）水平，Western blot法测定小鼠肝细胞核内核转录因子E2相关因子2（nuclear transcriptionfactor E2 related factor 2，Nrf2）、细胞质kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1（kelch-like ECH-associated protein 1，Keap1）、肝脏内Toll样受体4（Toll-like receptor 4，TLR4）以及细胞核内核因子-κB p65（nuclear factor-kappa B，NF-κB p65）蛋白表达，实时荧光定量PCR测定小鼠肝脏中谷氨酸半胱氨酸连接酶催化亚基（glutamate-cysteine ligase catalytic subunit，GCLC）、谷氨酸半胱氨酸连接酶调节亚基（glutamate-cysteine ligase regulatory subunit，GCLM）、血红素氧合酶1（heme oxygenase-1，HO-1）、还原型辅酶/醌氧化还原酶[NAD（P）H dehydrogenase quinone 1，NQO-1]基因mRNA相对表达水平，初步探究藏族药二十五味松石丸改善APAP致小鼠肝损伤的作用机制。结果显示，与模型组相比，二十五味松石丸给药组小鼠肝脏病理损伤程度有所改善；血清中AST、ALT水平有所降低；肝脏中GSH、SOD、CAT、T-AOC水平有所升高，MDA、MPO有所降低；血清TNF-α、IL-6水平有所降低；小鼠肝脏细胞质Keap1、细胞核NF-κB p65表达有所减少，细胞核Nrf2表达有所增加，肝脏TLR4表达无显著性差异；GCLC、GCLM、HO-1、NQO-1等抗氧化基因mRNA相对表达量也有所增加。研究结果表明，二十五味松石丸可减轻APAP引起的氧化损伤与炎症反应，其作用机制可能与Keap1/Nrf2信号通路以及TLR4/NF-κB p65通路上的信号转导因子有关。