为阐明当归补血汤物质基准的关键质量属性，通过制备21批物质基准，分别建立2套当归补血汤物质基准指纹图谱及其含量测定的检测方法，明确其指纹图谱的峰归属，相似度范围，浸出物范围，指标性成分阿魏酸、毛蕊异黄酮葡萄糖苷和黄芪甲苷的含量以及转移率范围。结果表明，不同批次物质基准的指标性成分含量和转移率如下：当归中指标性成分阿魏酸质量分数为0.037%~0.084%，转移率为31.41%~98.88%；黄芪中指标性成分黄芪甲苷质量分数为0.021%~0.059%，转移率为32.18%~118.57%；毛蕊异黄酮葡萄糖苷质量分数为0.002%~0.023%，转移率为11.51%~45.65%；浸出物为18.4%~36.1%；21批物质基准指纹图谱相似度均良好（>0.9）；该研究通过HPLC指纹图谱及HPLC指标性成分含量测定初步建立了经典名方当归补血汤物质基准质量控制方法，为经典名方当归补血汤的后续开发及相关制剂的质量控制提供依据。