探讨槐耳上清（Huaier extract supernatant，HES）对人胃癌HGC-27和MGC-803细胞增殖、凋亡、自噬和体外迁移能力的影响及其分子作用机制。采用HPLC-MS对HES中的主要成分进行简单初步分析。通过MTT法、集落形成实验、EdU染色法探究HES对人胃癌HGC-27和MGC-803细胞增殖的影响。利用Hoechst染色法、流式细胞术明确HES对人胃癌HGC-27和MGC-803细胞凋亡的影响。通过吖啶橙染色法和细胞划痕实验分别研究HES对人胃癌HGC-27和MGC-803细胞自噬和体外迁移能力的影响。借助Western blot检测HES对人胃癌HGC-27和MGC-803细胞中与凋亡、上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）以及信号通路相关的蛋白表达水平的调控作用。结果显示，HES中主要含有一些极性较大的成分。HES能够明显降低人胃癌细胞的细胞活力，且具有浓度和时间依赖性，给药处理人胃癌HGC-27和MGC-803细胞48 h时，其半数抑制浓度（IC₅₀）分别为7.56、10.77 g·L^-1。同时，HES能够显著抑制人胃癌细胞的集落形成能力和短期增殖能力。8 g·L^-1的HES作用于2种人胃癌细胞72 h，细胞凋亡率分别为62.13%±8.92%和54.50%±3.26%。HES还能够促进人胃癌细胞发生自噬，并削弱人胃癌细胞的体外迁移能力。此外，HES能够上调人胃癌细胞中凋亡标志物PARP的剪切水平和上皮细胞标志物E-cadherin的蛋白水平，并下调p-mTOR、p-S6和p-ERK的蛋白水平。因此，HES是槐耳发挥抗肿瘤作用的有效成分之一，其能够抑制人胃癌细胞的增殖和迁移，并诱导其发生凋亡和自噬，而且mTOR信号和ERK信号可能参与了HES的抗胃癌作用。该研究能够为槐耳的深入研究和临床应用提供新的参考，对进一步推动槐耳的科学开发利用具有重要意义。