花椒是芸香科花椒属落叶小乔木。其属约250种，广泛分布于亚洲、非洲、大洋洲、北美洲的热带和亚热带地区，温带较少。其中以我国栽培面积最大、产量最高，有45种13变种[1]。花椒的果皮，是传统的中药、香料和调味剂[2]。花椒性辛、温，归脾、胃、肾经，具有温中止痛、杀虫止痒的功能，用于脘腹冷痛、呕吐泄泻、虫积腹痛，外治湿疹、阴痒[3]。目前，已有超过30种有关花椒的处方被收载于2015年版《中国药典》，如乌梅丸、全鹿丸及纯阳正气丸等[3-4]，足见其广泛的临床应用。作为常用的药食同源植物，国内外学者已对其化学成分开展了大量研究工作，研究表明花椒的化学成分主要包括挥发油、生物碱、酰胺、木脂素、黄酮、萜类等[5-6]，但已有研究多侧重于挥发油类成分的GC-MS分析，其他类型成分研究较少。2015年版《中国药典》中关于花椒含量测定也仅针对挥发油类化合物，指标成分单一。课题组前期研究发现花椒酰胺类成分对皮质酮损伤的PC12细胞具有显著的神经保护作用[7]，表明花椒非挥发油类成分具有重要的研究价值。因此，系统研究花椒的化学成分特别是非挥发油类成分十分必要，不仅能够丰富该属植物中化学成分的结构类型，为后续展开相关生物活性研究提供物质基础，而且能为药材寻找特征性质控指标成分提供科学依据[8-10]。笔者对花椒果皮95%乙醇提取物的化学成分进行系统研究，从其二氯甲烷部位和正丁醇部位分离得到14个化合物，分别鉴定为(1S，3S)-1-甲基-1，2，3，4-四氢-β-咔啉-3-羧酸(1)，(3S)-1，2，3，4-四氢-β-咔啉-3-羧酸(2)，芹菜素-7，4′-二甲醚(3)，芫花素(4)，淫羊萑次苷F2(5)，breyniaionoside A(6)，3-甲氧基苯乙醇-4-O-β-D-葡萄糖苷(7)，3-甲氧基-5-羟基苯酚-1-O-β-D-葡萄糖苷(8)，苔黑酚葡萄糖苷(9)，紫丁香苷(10)，4-[(3S)-3-羟基丁基]-2-甲氧基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷(11)，南烛木树脂酚-3a-O-β-D-葡萄糖苷(12)，2-甲丙基-6-O-β-D-呋喃芹糖基-β-D-吡喃葡萄糖苷(13)和(E)-6-羟基-2，6-二甲基辛-2，7-二烯酸(14)，所有化合物均为首次从该植物中分离得到，其中化合物1～4，12，14为首次从花椒属植物中分离得到。
1 材料
UV2501型紫外分光光度仪(日本Shimadzu)，FTS-65a型红外光谱仪(美国Bio-Rad)，AVANCE III500型和AM 600型核磁共振仪(瑞士Bruker)，LTQ Orbitrap XL Mass(美国Thermo)，2535型semi-PHPLC(配置2489型UV检测器，美国Waters)；YMC-Pack ODS-A色谱柱(10 mm×250 mm，5 μm)，ODS-A-HG 12 nm s～50 μm(日本YMC)；Heating Both Ⅱ490型旋转蒸发仪(瑞士Buchi)。柱色谱用硅胶(60～80，100～200，200～300目)，薄层色谱用硅胶GF254(青岛海洋化工厂)；LH-20型羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20，瑞典GE Healthcare)；D101大孔吸附树脂(日本三菱)；常规用试剂均为分析纯(北京化工厂)。
花椒果皮购自北京同仁堂药材责任有限公司，经中国医学科学院药用植物研究所张本刚研究员鉴定为芸香科花椒属植物花椒Zanthoxylum bungeanum的果皮，标本(No.1000203)保存于中国医学科学院药用植物研究所国家中药化合物库。
2 方法
花椒干燥果皮23.5 kg，粉碎后用95%乙醇冷浸3次，每次7 d，减压浓缩得到95%乙醇浸膏5.1 kg。将其拌于10 kg硅藻土上，分别用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、甲醇和水常压洗脱，得到石油醚部位1 250 g，二氯甲烷部位470 g，乙酸乙酯部位301 g，正丁醇部位268 g，甲醇部位246 g，水部位2 000 g。
取二氯甲烷部位450 g进行硅胶柱色谱分离，以石油醚-丙酮系统(100∶0～1∶1)梯度洗脱，所得流分通过TLC合并得到Fr.C1～Fr.C10共10个流分。Fr.C2(31 g)经硅胶柱色谱以石油醚-乙酸乙酯系统(100∶0～1∶1)梯度洗脱所得流分经Sephadex LH-20柱色谱以二氯甲烷-甲醇系统(1∶1)洗脱进一步纯化得到化合物3(8 mg)和4(12.5 mg)。
取正丁醇部位250 g吸附于D101大孔树脂，依次用20%，50%和90%乙醇洗脱，合并洗脱流分得到Fr.B1～Fr.B3共3个部位。Fr.B1(78 g)经硅胶柱色谱以二氯甲烷-甲醇系统(30∶0～6∶1)梯度洗脱得到流分Fr.B1.1～Fr.B1.5。其中Fr.B1.3(14 g)经开放ODS柱色谱处理后得到流分Fr.B1.3.1～Fr.B1.3.7。Fr.B1.3.2(2.5 g)经开放ODS柱色谱处理后进一步通过HPLC半制备分离纯化得到化合物7(12 mg)，8(17 mg)和9(24 mg)。Fr.B1.3.3(1.2 g)经HPLC制备及HPLC半制备分离纯化得到化合物6(8 mg)，10(10 mg)和13(12 mg)。Fr.B1.3.4(1.7 g)经硅胶柱色谱以二氯甲烷-甲醇系统(6∶1)洗脱得到的流分通过HPLC半制备分离纯化得到化合物5(5 mg)和11(22 mg)。Fr.B1.3.6(2.6 g)经硅胶柱色谱以二氯甲烷-甲醇系统(6∶1)洗脱得到流分Fr.B1.3.6.1～Fr.B1.3.6.3。Fr.B1.3.6.2通过HPLC半制备分离纯化得到化合物12(8 mg)。Fr.B1.4(10 g)经开放ODS柱色谱处理后得到流分Fr.B1.4.1～Fr.B1.4.4。Fr.B1.4.1(1.4 g)通过HPLC半制备分离纯化得到化合物1(7 mg)。Fr.B1.4.2(1.6 g)通过HPLC半制备分离纯化得到化合物2(5 mg)。Fr.B2(86 g)经硅胶柱色谱以二氯甲烷-甲醇系统(30∶1～1∶1)梯度洗脱得到Fr.B2.1～Fr.B2.10。将Fr.B2.3(2.0 g)经硅胶柱色谱用石油醚-丙酮系统(9∶1～1∶2)梯度洗脱得到Fr.B2.3.1～Fr.B2.3.10。Fr.B2.3.4(683 mg)经硅胶柱以石油醚-乙酸乙酯系统(5∶1～1∶1)梯度洗脱得到Fr.B2.3.4.1～Fr.B2.3.4.12。Fr.B2.3.4.4(77 mg)通过HPLC半制备分离纯化得到化合物14(9 mg)。
3 结构鉴定
化合物1 白色针状结晶(甲醇)。10%硫酸乙醇溶液显棕褐色，碘化铋钾显橘红色。HR-ESI-MS m/z 231.113 2 [M＋H]＋(理论值231.113 4)，提示化合物分子式为C13H14N2O2。1H-NMR(Methanol-d4，500 MHz)δH：7.49(1H，d，J＝7.8 Hz，H-5)，7.34(1H，d，J＝8.1 Hz，H-8)，7.14(1H，m，H-6)，7.05(1H，m，H-7)，4.71(1H，m，H-1)，3.97(1H，dd，J＝12.1，5.1 Hz，H-3)，3.45(1H，m，H-4)，3.03(1H，m，H-4)，1.75(3H，d，J＝6.9 Hz，H-10)。13C-NMR(Methanol-d4，125 MHz)δC：173.6(C-11)，138.6(C-8a)，131.3(C-9a)，127.5(C-4b)，123.3(C-7)，120.6(C-6)，119.2(C-5)，112.3(C-8)，107.8(C-4a)，59.8(C-3)，51.2(C-1)，24.3(C-4)，17.1(C-10)。以上数据与文献[11]基本一致，故其结构鉴定为(1S，3S)-1-甲基-1，2，3，4-四氢-β-咔啉-3-羧酸。
化合物2 白色针状结晶(甲醇)，10%硫酸乙醇溶液显棕褐色。HR-ESI-MS m/z 217.097 4[M＋H]＋(理论值217.097 7)，提示化合物分子式为C12H12N2O2。1H-NMR(DMSO-d6，500 MHz)δH：10.89(1H，s，2-NH)，7.44(1H，d，J＝7.8 Hz，H-5)，7.32(1H，d，J＝8.0 Hz，H-8)，7.07(1H，t，J＝7.2 Hz，H-6)，6.99(1H，t，J＝7.2 Hz，H-7)，4.22(1H，d，J＝15.5 Hz，H-1a)，4.15(1H，d，J＝15.5 Hz，H-1b)，3.59(1H，dd，J＝10.5，5.1 Hz，H-3)，3.13(1H，dd，J＝16.0，5.1 Hz，H-4a)，2.81(1H，dd，J＝16.0，10.5 Hz，H-4b)。13C-NMR(DMSO-d6，125 MHz)δC：169.7(C-10)，136.7(C-8a)，128.3(C-9a)，126.7(C-4b)，121.7(C-7)，119.2(C-6)，118.3(C-5)，111.6(C-8)，107.2(C-4a)，57.1(C-3)，40.9(C-1)，23.4(C-4)。以上数据与文献[12]基本一致，故其结构鉴定为(3S)-1，2，3，4-四氢-β-咔啉-3-羧酸。
化合物3 黄色粉末，10%硫酸乙醇溶液显黄色。HR-ESI-MS m/z 321.074 4[M＋Na]＋(理论值321.073 9)，提示化合物分子式为C17H14O5。1H-NMR(Chloroform-d，500 MHz)δH：11.74(1H，s，5-OH)，8.18(2H，d，J＝9.0 Hz，H-2′，H-6′)，7.04(2H，d，J＝9.0 Hz，H-3′，H-5′)，6.61(1H，s，H-3)，6.49(1H，d，J＝2.2 Hz，H-8)，6.38(1H，d，J＝2.2 Hz，H-6)，3.89(6H，s，7-OCH3，4′-OCH3)。以上数据与文献[13]基本一致，故其结构鉴定为芹菜素-7，4′-二甲醚。
化合物4 黄色粉末，10%硫酸乙醇溶液显黄色。HR-ESI-MS m/z 285.076 1[M＋H]＋(理论值285.076 3)，提示化合物分子式为C16H13O5。1H-NMR(DMSO-d6，600 MHz)δH：12.16(1H，s，5-OH)，9.64(1H，s，4′-OH)，7.95(2H，J＝9.0 Hz，H-2′，H-6′)，7.13(2H，J＝9.0 Hz，H-3′，H-5′)，6.88(1H，s，H-3)，6.65(1H，d，J＝2.0 Hz，H-8)，6.32(1H，d，J＝2.0 Hz，H-6)，3.90(3H，s，7-OCH3)。以上数据与文献[14]基本一致，故其结构鉴定为芫花素。
化合物5 白色针状结晶(甲醇)，10%硫酸乙醇溶液显紫色。HR-ESI-MS m/z 425.142 2 [M＋Na]＋(理论值425.142 4)，提示化合物分子式为C18H26O10。1H-NMR(Methanol-d4，500 MHz)δH：7.43(2H，m，H-3，H-5)，7.33(2H，m，H-2，H-6)，7.28(1H，m，H-4)，5.04(1H，d，J＝2.5 Hz，H-1″)，4.89(1H，d，J＝11.9 Hz，H-1′)。13C-NMR(Methanol-d4，125 MHz)δC：139.0(C-1)，129.3(C-3，C-5)，129.2(C-2，C-6)，128.7(C-4)，111.0(C-1″)，103.2(C-1′)，80.6(C-3″)，78.0(C-3′，C-2″)，77.0(C-5′)，75.1(C-2′)，75.0(C-4″)，71.8(C-7，4′)，68.7(C-6″)，65.6(C-5″)。以上数据与文献[15]基本一致，故其结构鉴定为淫羊藿次苷F2。
化合物6 无色油状物，10%硫酸乙醇显黄色。HR-ESI-MS m/z 427.194 8[M＋H]＋(理论值427.194 4)，提示化合物分子式为C19H32O9。1H-NMR(Methanol-d4，500 MHz)δH：5.95(1H，d，J＝15.9 Hz，H-7)，5.75(1H，dd，J＝15.9，7.5 Hz，H-8)，4.47(1H，m，H-9)，4.36(1H，d，J＝7.5 Hz，H-1′)，3.86(1H，dd，J＝11.9，2.3 Hz，H-6′a)，3.65(1H，m，H-6′b)，3.62(2H，m，H-10)，3.29(3H，m，H-2′，H-3′，H-4′)，3.20(1H，m，H-5′)，2.87(1H，d，J＝13.6 Hz，H-2ax)，2.46(1H，t，J＝13.4 Hz，H-4ax)，2.31(1H，m，H-5)，2.13(1H，m，H-4eq)，1.82(1H，dd，J＝13.6，2.2 Hz，H-2eq)，0.97(3H，s，H-11)，0.95(3H，d，J＝6.6 Hz，H-13)，0.93(3H，s，H-12)。13C-NMR(Methanol-d4，125 MHz)δC：214.8(C-3)，139.0(C-7)，128.8(C-8)，100.9(C-1′)，79.8(C-9)，78.3(C-6)，78.1(C-3′，5′)，75.0(C-2′)，71.6(C-4′)，62.7(C-6′)，66.3(C-10)，52.4(C-4)，46.1(C-2)，43.8(C-1)，37.9(C-5)，25.0(C-12)，25.1(C-11)，16.7(C-13)。以上数据与文献[16]基本一致，故其结构鉴定为breyniaionoside A。
化合物7 白色针状结晶(甲醇)，10%硫酸乙醇溶液显紫色。HR-ESI-MS m/z353.120 5[M＋Na]＋(理论值353.121 2)，提示化合物分子式为C15H22O8。1H-NMR(Methanol-d4，500 MHz)δH：7.09(1H，d，J＝8.2 Hz，H-5)，6.89(1H，d，J＝2.0 Hz，H-2)，6.77(1H，dd，J＝8.2，2.0 Hz，H-6)，4.84(1H，d，J＝7.2 Hz，H-1′)，3.85(1H，m，H-6′a)，3.85(3H，s，3-OCH3)，3.73(2H，t，J＝7.0 Hz，H-8)，3.68(1H，m，H-6′b)，3.42(4H，m，H-2′，H-3′，H-4′，H-5′)，2.77(2H，t，J＝7.0 Hz，H-7)。13C-NMR(Methanol-d4，125 MHz)δC：150.7(C-3)，146.4(C-4)，135.5(C-1)，122.5(C-6)，118.3(C-5)，114.6(C-2)，103.1(C-1′)，78.1(C-3′)，77.8(C-5′)，75.0(C-2′)，71.3(C-4′)，62.5(C-6′)，64.3(C-8)，39.8(C-7)，56.7(3-OCH3)。以上数据与文献[17]基本一致，故其结构鉴定为3-甲氧基苯乙醇-4-O-β-D-葡萄糖苷。
化合物8 白色针状结晶(甲醇)，10%硫酸乙醇溶液显色由黄变黑色。HR-ESI-MSm/z)：303.107 2 [M＋H]＋(理论值303.108 0)，提示化合物分子式为C13H18O8。1H-NMR(Methanol-d4，500 MHz)δH：6.20(1H，t，J＝2.1 Hz，H-2)，6.18(1H，t，J＝2.1 Hz，H-6)，6.05(1H，t，J＝2.1 Hz，H-4)，4.84(1H，d，J＝7.4 Hz，H-1′)，3.90(1H，dd，J＝12.1，2.1 Hz，H-6′a)，3.71(3H，s，3-OCH3)，3.70(1H，m，H-6′b)，3.41(4H，m，H-2′，H-3′，H-4′，H-5′)。13C-NMR(Methanol-d4，125 MHz)δC：162.9(C-3)，160.9(C-1)，160.1(C-5)，102.2(C-1′)，97.7(C-6)，96.7(C-2)，95.4(C-4)，78.1(C-5′)，78.0(C-3′)，74.8(C-2′)，71.3(C-4′)，62.5(C-6′)，55.7(3-OCH3)。以上数据与文献[18]基本一致，故其结构鉴定为3-甲氧基-5-羟基苯-1-O-β-D-葡萄糖苷。
化合物9 白色粉末，10%硫酸乙醇溶液显紫色。HR-ESI-MS m/z 287.113 5 [M＋H]＋(理论值287.113 1)，提示化合物分子式为C13H18O7。1H-NMR(Methanol-d4，500 MHz)δH：6.42(1H，s，H-2)，6.36(1H，s，H-4)，6.29(1H，s，H-6)，4.84(1H，d，J＝7.4 Hz，H-1′)，3.89(1H，dd，J＝12.0，2.0 Hz，H-6′a)，3.70(1H，dd，J＝12.0，5.1 Hz，H-6′b)，3.42(4H，m，H-2′，H-3′，H-4′，H-5′)，2.22(3H，s，H-7)。13C-NMR(Methanol-d4，125 MHz)δC：160.1(C-1)，159.3(C-3)，141.2(C-5)，111.2(C-6)，109.7(C-4)，102.2(C-2，1′)，78.1(C-5′)，78.0(C-3′)，74.9(C-2′)，71.4(C-4′)，62.5(C-6′)，21.7(C-7)。以上数据与文献[19]基本一致，故其结构鉴定为苔黑酚葡萄糖苷。
化合物10 白色针状结晶(甲醇)，10%硫酸乙醇显紫色。HR-ESI-MS m/z 395.131 4 [M＋Na]＋(理论值395.131 8)，提示化合物分子式为C17H24O9。1H-NMR(Methanol-d4，500 MHz)δH：6.75(2H，s，H-3，H-5)，6.55(1H，dd，J＝15.8，1.7 Hz，H-1′)，6.33(1H，dt，J＝15.8，5.6 Hz，H-2′)，4.88(1H，d，J＝5.7 Hz，H-1″)，4.22(2H，dd，J＝5.6，1.6 Hz，H-3′)，3.86(6H，s，2，6-OCH3)，3.78(1H，dd，J＝12.0，2.4 Hz，H-6″a)，3.66(1H，dd，J＝12.0，5.2 Hz，H-6″b)，3.48(1H，m，H-3″)，3.41(2H，m，H-4″，H-5″)，3.21(1H，m，H-2″)。13C-NMR(Methanol-d4，125 MHz)δC：154.3(C-2，C-6)，135.9(C-1)，135.2(C-1′)，131.3(C-4)，130.0(C-2′)，105.4(C-3，C-5)，105.3(C-1″)，78.4(C-5″)，77.8(C-3″)，75.7(C-2″)，71.3(C-4″)，63.6(C-3′)，62.6(C-6″)，57.0(2，6-OCH3)。以上数据与文献[20]基本一致，故其结构鉴定为紫丁香苷。
化合物11 白色针状结晶(甲醇)，10%硫酸乙醇溶液显紫色。HR-ESI-MS m/z 359.170 9 [M＋H]＋(理论值359.170 6)，提示化合物分子式为C17H26O8。1H-NMR(Methanol-d4，500 MHz)δH：7.07(1H，d，J＝8.2 Hz，H-9)，6.86(1H，d，J＝2.0 Hz，H-6)，6.74(1H，dd，J＝8.2，2.0 Hz，H-10)，4.84(1H，d，J＝7.2 Hz，H-1′)，3.88(1H，m，H-6′a)，3.86(3H，s，7-OCH3)，3.71(2H，m，H-2，H-6′b)，3.47(2H，m，H-3′，H-4′)，3.38(2H，m，H-2′，H-5′)，2.69(1H，m，H-3a)，2.60(1H，m，H-3b)，1.70(2H，m，H-4)，1.18(3H，d，J＝6.2 Hz，H-1)。13C-NMR(Methanol-d4，125 MHz)δC：150.7(C-7)，146.1(C-8)，138.8(C-5)，121.9(C-10)，118.3(C-9)，114.0(C-6)，103.1(C-1′)，78.1(C-3′)，77.8 (C-5′)，75.0(C-2′)，71.4(C-4′)，67.8(C-2)，62.5(C-6′)，56.7(7-OCH3)，42.2(C-4)，32.8(C-3)，23.6(C-1)。以上数据与文献[21]基本一致，故其结构鉴定为4-[(3S)-3-羟基丁基]-2-甲氧基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷。
化合物12 白色粉末，10%硫酸乙醇溶液显色由蓝色逐渐变成棕色。HR-ESI-MS m/z 605.221 9 [M＋Na]＋(理论值605.221 0)，提示化合物分子式为C28H38O13。1H-NMR(Methanol-d4，500 MHz)δH：6.58(1H，s，H-8)，6.43(2H，s，H-2′，H-6′)，4.42(1H，d，J＝6.2 Hz，H-4)，4.28(1H，d，J＝7.8 Hz，H-1″)，3.90(1H，dd，J＝9.8，5.5 Hz，H-3α)，3.85(3H，s，7-OCH3)，3.84(1H，m，H-6″b)，3.75(6H，s，3′-OCH3，5′-OCH3)，3.65(2H，m，H-2α，H-6″a)，3.55(1H，dd，J＝10.9，6.6 Hz，H-2β)，3.45(1H，dd，J＝9.8，4.0 Hz，H-3β)，3.37(1H，t，J＝8.9 Hz，H-3″)，3.36(3H，s，5-OCH3)，3.29(1H，m，H-4″)，3.25(2H，m，H-2″，H-5″)，2.72(1H，dd，J＝15.2，4.7 Hz，H-1a)，2.62(1H，dd，J＝15.2，11.5 Hz，H-1b)，2.09(1H，m，H-3)，1.71(1H，m，H-2)。13C-NMR(Methanol-d4，125 MHz)δC：149.0(C-3′，C-5′)，148.6(C-7)，147.6(C-5)，139.3(C-1′)，138.9(C-6)，134.4(C-4′)，130.2(C-9)，126.4(C-10)，107.8(C-8)，106.9(C-2′，6′)，104.8(C-1″)，78.2(C-3″)，77.9(C-5″)，75.2(C-2″)，71.6(C-3a)，71.4(C-4″)，66.2(C-2a)，62.8(C-6″)，60.1(5-OCH3)，56.8(3′，5′-OCH3)，56.6(7-OCH3)，46.7(C-3)，42.8(C-4)，40.6(C-2)，33.9(C-1)。以上数据与文献[22]基本一致，故其结构鉴定为(＋)-南烛木树脂酚-3a-O-β-D-葡萄糖苷。
化合物13 白色针状结晶(甲醇)，10%硫酸乙醇溶液显紫色。HR-ESI-MS m/z 369.176 1 [M＋H]＋(理论值369.176 1)，提示化合物分子式为C15H28O10。1H-NMR(Methanol-d4，500 MHz)δH：5.01(1H，d，J＝2.4 Hz，H-1″)，4.21(1H，d，J＝7.8 Hz，H-1′)，3.97(1H，dd，J＝11.4，2.0 Hz，H-6′)，3.96(1H，d，J＝9.6 Hz，H-4″a)，3.90(1H，d，J＝2.4 Hz，H-2″)，3.76(1H，d，J＝9.6 Hz，H-4″b)，3.60(1H，m，H-6′)，3.57(2H，s，H-5″)，3.38(1H，m，H-5′)，3.34(1H，t，J＝9.2 Hz，H-3′)，3.30(2H，m，H-1)，3.27(1H，d，J＝9.2 Hz，H-4′)，3.17(1H，dd，J＝9.2，7.8 Hz，H-2′)，1.90(1H，m，H-2)，0.94(3H，d，J＝4.3 Hz，H-3)，0.93(3H，d，J＝4.3Hz，H-4)。13C-NMR(Methanol-d4，125 MHz)δC：111.0(C-1″)，104.6(C-1′)，80.6(C-3″)，78.1(C-2″)，78.0(C-3′)，77.7(C-1)，76.8(C-5′)，75.1(C-2′)，75.0(C-4″)，71.7(C-4′)，68.6(C-6′)，65.6(C-5″)，29.7(C-2)，19.7(C-3，4)。以上数据与文献[23]基本一致，故其结构鉴定为2-甲基丙基-6-O-β-D-呋喃芹糖基-β-D-吡喃葡萄糖苷。
化合物14 浅黄色油状液体，10%硫酸乙醇溶液显粉色。HR-ESI-MS m/z 207.098 7 [M＋Na]＋(理论值207.099 7)，提示化合物分子式为C10H16O3。1H-NMR(Methanol-d4，600 MHz)δH：6.76(1H，m，H-3)，5.91(1H，dd，J＝17.4，10.8 Hz，H-7)，5.21(1H，dd，J＝17.4，1.4 Hz，H-8a)，5.05(1H，dd，J＝10.8，1.4 Hz，H-8b)，2.22(2H，m，H-4)，1.79(3H，s，H-10)，1.60(2H，m，H-5)，1.26(3H，s，H-9)。13C-NMR(Methanol-d4，150 MHz)δC：171.7(C-1)，145.9(C-7)，143.9(C-3)，128.8(C-2)，112.4(C-8)，73.6(C-6)，41.8(C-5)，27.8(C-9)，24.5(C-4)，12.4(C-10)。以上数据与文献[24]基本一致，故其结构鉴定为(E)-6-羟基-2，6-二甲基辛-2，7-二烯酸。
4 讨论
花椒是一味家喻户晓的香辛调料，同时也是常用的温中散寒中药，在中国分布广泛且具有悠久的应用历史。据报道，花椒属植物具有麻醉、镇痛、抗炎、抑菌、抗癌等作用[25-28]。本实验对花椒二氯甲烷层和正丁醇层进行了系统的分离，得到14个化合物，包括6个酚苷类，2个生物碱类，2个黄酮类，1个木脂素类和3个其他类化合物，且这些化合物均为首次从花椒植物中分离得到，丰富了花椒属化合物的种类和数量。在这些酚苷类化合物中，淫羊藿次苷F2(化合物5)能抑制肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激的核因子κB(NF-κB)的产生[半数抑制浓度(IC50)＝16.25 μmol·L-1]，显示出抗炎活性[29]。苔黑酚葡萄糖苷(化合物9)可通过cAMP-PKA信号通路调控CYP3A的表达[30]。紫丁香苷(化合物10)可通过促进细胞凋亡因子Caspase-3活性增加，从而抑制人肝癌细胞Hep G2以及人前列腺癌细胞PC-3的生长(IC50分别为40.13，88.08 mg·L-1)[31]，与花椒属植物的某些药理作用一致。故推测酚苷类化合物，为花椒属植物的药效物质之一，为进一步生物活性研究及质控指标成分提供科学依据。
