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白术多糖通过靶向miR-34a抑制食管癌细胞免疫检查点PD-L1表达的机制研究

白术多糖通过靶向miR-34a抑制食管癌细胞免疫检查点PD-L1表达的机制研究

懿存
玉龙
修琦
艺婉
启龙
中国中药杂志第47卷, 第6期pp.1658-1665纸质出版 2022-03
183900

免疫检查点PD-L1介导的机体免疫抑制是肿瘤发病的重要特征,PD-L1作为重要的免疫抑制分子,可通过与PD-1结合诱导T细胞衰竭,抑制PD-L1的表达是恢复T细胞功能的关键。中药白术有抗肿瘤、抗炎、抗氧化、降血糖等多种药理学作用,其中白术的多糖类成分对机体的免疫调节起着至关重要的作用,然而其对与免疫抑制密切相关的免疫检查点的作用未见报道。与正常组织相比,microRNA-34a(miR-34a)在食管癌组织中表达明显降低。该研究意在探究白术多糖对食管癌细胞的抑制作用,及其对PD-L1表达的抑制作用与miR-34a的关系,阐释白术多糖抗肿瘤的部分分子机制。首先筛选不同的人食管癌细胞株(EC9706细胞、EC-1细胞、TE-1细胞、EC109细胞),检测各细胞株PD-L1的表达水平,选取PD-L1高表达细胞株EC109细胞进行后续实验。细胞增殖实验结果显示白术多糖对EC109细胞具有抑制作用;荧光实时定量PCR(quantitative realtime PCR,qPCR)和Western blot实验发现白术多糖在基因和蛋白水平上均能显著降低PD-L1的表达,同时促进肿瘤抑制因子miR-34a的表达;通过共聚焦成像和荧光素酶分析发现,PD-L1受miR-34a的密切调控,阻断miR-34a的功能后,可逆转白术多糖对PD-L1蛋白表达的抑制作用,说明白术多糖对PD-L1蛋白的抑制作用可能是通过增加miR-34a的表达并调控其下游靶基因实现的。通过上述实验结果,得出靶向miR-34a并增加其表达是白术多糖抑制PD-L1发挥抗肿瘤作用的关键机制。

白术多糖miR-34aPD-L1食管癌